University thesis:
Dissertation, Friedrich-Schiller-Universität Jena, 2023
Footnote:
Abschluss Examen: 01.12.2023
Description:
Die adulte Neurogenese konnte bei Säugetieren im Gyrus dentatus des adulten Gehirns nachgewiesen werden, welcher als ein Teil der Hippocampusformation eine entscheidende Rolle bei Lern- und Gedächtnisvorgängen spielt. Weiterhin wurde der Na+-K+-2Cl--Kotransporter (NKCC1) in neuronalen Vorläuferzellen als wesentlicher Mechanismus für die Veränderung der intrazellulären Chlorid-Homöostase identifiziert. In dem vorliegenden Projekt sollte das Schicksal der proliferierenden Stamm- und Vorläuferzellen des adulten Gyrus dentatus nach NKCC1-Knockout (NKCC1ko) verfolgt sowie der Einfluss auf die Zellzykluseigenschaften dieser Zellpopulationen bestimmt werden, um einen möglichen neuen Mechanismus zur Aufrechterhaltung des neuronalen Stammzellpools zu identifizieren. Dabei wurden transgene NestinCreERT2::NKCC1fl/fl::tdTomato::FUCCIgreen-Mäuse verwendet, welchen anhand eines definierten Schemas zunächst Tamoxifen und anschließend die Proliferationsmarker CldU (5-Chloro-2'-deoxyuridine) und IdU (5-Iodo-2‘-deoxyuridine) separat injiziert wurden. Die darauffolgenden Immunfluoreszenzfärbungen wurden mittels konfokaler Mikroskopie ausgewertet. Insgesamt konnte eine verstärkte Aktivierung der Stammzellen nach NKCC1ko gezeigt werden. Die Analyse im Zeitverlauf ergab eine konstante Aktivierung der Stamm- und Vorläuferzellen nach NKCC1ko. Die Kalkulation der Zellzykluslänge der Stammzellen zeigte eine tendenzielle Verlängerung nach NKCC1ko gegenüber der in der Literatur beschriebenen Zellzykluslängen an. Weiterhin konnte geschlussfolgert werden, dass die Länge der S-Phase nicht hauptsächlich durch den NKCC1ko reguliert wird. Insgesamt ermöglichte die Identifikation der Zellzykluseigenschaften der Stamm- und Vorläuferzellen des adulten Gyrus dentatus und dessen Verknüpfung mit deren Aktivierungs- und Selbsterneuerungsverhalten eine bessere Beschreibung eines möglichen neuen Mechanismus für eine Regeneration oder Expansion des neuralen Stammzellpools.