Description:
Die physiologische Osteoblastendifferenzierung ist ein hoch komplexer Prozess, in dem der Transkriptionsfaktor Runx2 essentiell ist und über multiple Mechanismen seine Wirkung entfaltet. Da die meisten Erkenntnisse über die physiologische Funktion von Runx2 in murinen Zellmodellen erlangt worden sind, haben wir uns mit der Frage beschäftigt, ob die bisher gefundenen Gesetzmäßigkeiten auch im humanen Modell Gültigkeit besitzen. Hierfür wurden siRNA-basierte Runx2 knock-down Studien in primären Zellen (pHOB) aus dem menschlichen Knochen durchgeführt, welche in osteogenen Kulturbedingungen als ein Modell für die Osteoblastendifferenzierung etabliert worden waren. Für einen transienten und auch stabilen Runx2 knock-down wurde ein siRNA-Expressionsplasmid kloniert, welches ein Vorläufermolekül (shRNA) der gewünschten Runx2-siRNA in der transfizierten Zielzelle exprimiert und so die RNA-Interferenz induziert ...