University thesis:
Dissertation, Albert-Ludwigs-Universität Freiburg, 2017
Footnote:
IN COPYRIGHT http://rightsstatements.org/page/InC/1.0 rs
Description:
Abstract: Ziel dieser Arbeit war es, die Wirkung fünf verschiedener Kompositmaterialien auf die Proteinexpression humaner Gingivafibroblasten (HGF) und immortalisierter humaner Gingivakeratinozyten (IHGK) zu untersuchen.<br>Material und Methoden: Die untersuchten Komposite waren Ceram XTM, FiltekTM Silorane, FiltekTM Supreme XTE, FusioTM Liquid Dentin und VertiseTM Flow. Aus jedem Material wurden (gemäß ISO 10993-12:2012) 34 Proben nach Herstellerangaben angefertigt. Jede Probe wurde in 800µl Zellkulturmedium gelagert, je zur Hälfte in Keratinozyten- und Fibroblastenmedium. Nach 24 Stunden und 72 Stunden wurden die Proben entfernt und die Zellen mit den so entstandenen Eluaten sowie nativem Medium als Kontrolle inkubiert. Während der Inkubationszeit wurde eine Impedanzanalyse mit dem xCELLigence® System (Roche) durchgeführt. Nach einer Inkubationszeit von 24 Stunden und 72 Stunden erfolgte die semiquantitative Proteinexpressionsanalyse repräsentativer Marker des Zellverhaltens mithilfe von Immunfluoreszenzfärbungen. Weiterhin wurde die Proteinexpression zweier Entzündungsmarker quantitativ mittels ELISA bestimmt.<br>Ergebnisse: In der xCELLigence® Analyse zeigten die IHGK für die selbstadhäsiven Komposite FusioTM Liquid Dentin und VertiseTM Flow einen eindeutig verminderten Impedanzanstieg, der auf eine geringere Proliferation und/oder Adhäsion sowie eine veränderte Morphologie der Zellen schließen lässt. Bei den HGF war die Impedanzänderung aller Gruppen vergleichbar.<br>Die Proteinexpression wurde insgesamt durch die Komposite beeinflusst. Bei den IHGK wurde die signaltransduzierende MAP-Kinase ERK nach 24 Stunden vor allem durch FusioTM Liquid Dentin und VertiseTM Flow aktiviert. Zeitverzögert war anhand dreierlei typischer Marker eine quantitativ verstärkte und morphologisch veränderte Differenzierung der Zellen zu beobachten. Das proinflammatorische Zytokin Interleukin 6 wurde von den IHGK nach 72 Stunden signifikant weniger exprimiert, wenn die Zellen mit Eluaten von FiltekTM Supreme XTE, FusioTM Liquid Dentin und VertiseTM Flow inkubiert wurden. Die HGF reagierten ähnlich, jedoch insgesamt weniger sensibel als die IHGK. <br>Schlussfolgerung: Die vorliegende Untersuchung zeigt, dass a) alle getesteten Kompositmaterialien die Expression der untersuchten Proteine in Gingivazellen modulieren, b) die selbstadhäsiven Komposite ausgeprägtere Effekte zeigen als die anderen Komposite und c) die Proteinexpression in Bezug auf Moleküle der Signaltransduktion, Differenzierung, Adhäsion und Inflammation moduliert wird