Anmerkungen:
Diese Datenquelle enthält auch Bestandsnachweise, die nicht zu einem Volltext führen.
Beschreibung:
Heparin wird als biospezifischer Ligand zur Proteinaufreinigung in der Biotechnolo-gie verwendet. Dieses Verfahren ist bei vielen Heparin-bindenden Proteinen sehr ergiebig. Heparin wird allerdings aus Schlachtabfällen von Schweinen gewonnen und birgt die Gefahr der Kontamination mit tierischen Pathogenen. Die aufgereinigten Proteine könnten aufgrund dessen ebenfalls kontaminiert sein, weshalb nach adäquaten Alternativen sowohl in der Biotechnologie als auch in der Pharmaindustrie geforscht wird. Im Rahmen dieser Dissertation wurden verschiedene Materialien mit synthetischen Liganden für die Aufreinigung des Modellproteins, dem basischen Fibroblasten-Wachstumsfaktor (bFGF), untersucht. Die verwendeten Aufreinigungsmethoden konnten der Mixed-Mode-Chromatographie (MMC) und pseudo-Affinitätschromatographie zugeordnet werden. Bei der MMC werden Materialien mit multimodalen Liganden eingesetzt, welche aufgrund ihrer molekularen Zusammen-setzung unterschiedliche Wechselwirkungen zum Analyten ausbilden können (ioni-sche Wechselwirkungen, Wasserstoffbrückenbindungen, Van-der-Waals-Wechselwirkungen), traditionelle Chromatographien beruhen auf nur einer Art von Wechselwirkungen. Materialien bei der pseudo-Affinitätschromatographie besitzen pseudo-biospezifische Liganden, die synthetisch hergestellt werden. Bei den verwendeten Liganden handelte es sich um Heparin-ähnliche Moleküle, die auf der molekularen Struktur des Heparins basierten. Es wurden acht multimodale und pseudo-biospezifische Materialien für die Aufreini-gung des bFGF eingesetzt und im Capture-Schritt sowie im intermediären Aufreini-gungsschritt in einer mehrstufigen Aufreinigung des bFGF getestet. Die Materialien-wurden hinsichtlich Reinheit, Wiederfindungsrate und Ausbeute des bFGF bewertet. Durch die Verwendung der multimodalen Materialien HiTrapTM CaptoTM MMC und ForesightTM NuviaTM cPrimeTM konnten zwei wirksame Alternativen ohne tierische Komponenten zur Aufreinigung des bioaktiven bFGF demonstriert werden. ; Heparin is known for its therapeutic benefits ...